Pathologie - Dienstleistungen

Unsere Untersuchungen umfassen das ganze Spektrum der konventionellen histopathologischen Beurteilung von Gewebeproben aller Organsysteme inklusive intraoperative Schnellschnitte zur Tumordiagnostik oder lückenlosen Schnittrandkontrolle.

Für die immunhistochemischen Untersuchungen  verwenden wir ein Panel der rund 100 diagnostisch relevantesten Antikörper. Wir bestimmen die therapie-relevanten immunhistochemischen Prognosefaktoren.
Wir führen die nötigen molekularpathologischen Untersuchungen selbst oder in Zusammenarbeit mit universitären Zentren durch.
(vgl. auch Abschnitt  FISH)

Allgemeine Hinweise
Bitte beachten Sie unsere Hinweise zur Präanalytik Histologie

Die Zytodiagnostik ist eine schnelle, genaue, kostengünstige und effektive Methode, deren Hauptziel einerseits der Nachweis bzw. Ausschluss neoplastischer / maligner Zellen, andererseits der Nachweis entzündlicher Veränderungen, von Erregern und amorphem Material ist.

Es wird die Exfoliativ-, die Punktions- und die Gynäkozytologie unterschieden.

Exfoliativzytologie

Die Exfoliativzytologie umfasst alle Organgebiete, welche durch Abstreichen, Punktionen oder Flüssigkeitsausscheidung der zytologischen Untersuchung zugänglich sind:
    Sputum
    Bronchialsekrete, Bronchiallavagen, BAL
    Abstriche von Haut und Schleimhautoberflächen
    Ergusspunktate (Pleura, Aszites, Gelenke)
    Urin
    Spülflüssigkeiten von Harnblase / ableitenden Harnwegen
    Mamillensekrete
    Liquor
    Gynäkozytologie (siehe separates Kapitel)

Punktionszytologie

Daneben die Punktionszytologie, die die Punktionen sämtlicher Organe beinhaltet. In unserem hausinternen Punktionsambulatorium werden folgende Organe ultraschallgesteuert punktiert:
    Mamma
    Schilddrüse
    Lymphknoten
    Speicheldrüsen
    Weichteiltumoren
    Haut-/Schleimhautläsionen

Für klinisch dringende Fälle führen wir auch Schnellbeurteilungen durch.

Wir verwenden neben der konventionellen Ausstrichtechnik auch die Zellblocktechnik, welche bessere Möglichkeiten für Zusatzuntersuchungen, vor allem eine ausgedehntere Immunhistochemie erlaubt.
Bei Punktionen in unserem Ambulatorium ergänzen wir die zytomorphologische Analyse von Punktaten bei Verdacht auf hämatologische Neoplasien mit der Durchflusszytometrie (FACS-Analyse)

Merkelzellkarzinom    PAP-Färbung

Merkelzellkarzimon    Zytokeratin 20

Allgemeine Hinweise
Bitte beachten Sie unsere Hinweise zur Präanalytik klinische Zytologie und Feinnadelpunktion (speziell auch zur Herstellung der Ausstriche).

Unser Untersuchungsspektrum umfasst:

konventionelle Methode (Objektträger-Ausstriche)
Dünnschichtmethode im Flüssigmedium (Thin Prep)

Sämtliche gefärbte Präparate werden von unseren Zytoanalytikerinnen gescreent und alle als normal befundeten Präparate werden von ihnen abgeschlossen. Unklare oder positive Befunde werden an die Ärzte/-innen der Zytologie weitergegeben und von diesen abgeschlossen.

Untersuchung auf
humane Papillomaviren (HPV) (siehe Präanalytik)
Chlamydien
Gonokokken
ausgehend von ThinPrep-Proben in Zusammenarbeit mit unserer Abteilung für Molekularbiologie (PCR).

Wir bieten einen hohen Qualitätsstandard mit jeweiligen Kontrollen zytologischer Vorbefunde und histopathologischer Korrelation (nur möglich, wenn zytologisches und histologisches Material unserem Institut gemeinsam zugesandt werden) sowie unabhängige Qualitätskontrollen.

Die diagnostische Einteilung unserer Befunde erfolgt nach der international üblichen Bethesda-Nomenklatur (2. Auflage, 2003)  mit Quervergleichen zur CIN-Nomenklatur.

Wir unterscheiden die statische und die Durchfluss-Zytometrie.

Statische DNA-Zytometrie

Sie dient der besseren Frühdiagnose von bösartigen Tumoren und beruht auf einer Messung des DNA-Gehaltes der Zellkerne. Die meisten bösartigen Tumoren zeigen eine Vermehrung des DNA-Gehaltes durch Vermehrung und Strukturstörung der Chromosomen. Die quantitativen Abweichungen des DNA-Gehaltes der Zellkerne von der Norm helfen in der Diagnostik einer Neoplasie und geben bei einzelnen Tumoren eine Aussage zur Prognose. Die Untersuchung kann an Zytologiepräparaten und nach spezieller Aufbereitung auch an formalinfixiertem und in Paraffin eingebettetem Gewebe durchgeführt werden. Die Zellkerne werden spezifisch gefärbt und interaktiv mit einem Bildanalysesystem ausgewertet. Das Ausmass der DNA-Abweichung von der Norm wird quantifiziert. Folgende Organe eignen sich für die Dignitätsdiagnostik: Abstriche von Gebärmutterhals, Mundhöhle, Kehlkopf, Bronchialsystem, Ösophagus, Magen- und Dickdarmschleimhaut, Ergüsse, Urin, Sputum, Abstriche der Kornea oder Gallengänge, FNP des Pankreas. Das Malignitätsgrading kann verbessert werden bei Prostata- und Harnblasenkarzinomen in frühen Stadien.
Diese Methode ist zur Zeit nicht aktiviert.

Durchflusszytometrie (FACS-Analyse)

Die Durchflusszytometrie (FACS = Fluorescence Activated Cell Sorting) ermöglicht das Zählen und die Analyse von zuvor mit Fluoreszenzfarbstoffen markierten Zellen, welche an einem Laserstrahl vorbeigeleitet werden.
Eine gleichzeitige Messung mit verschiedenen Fluoreszenzfarbstoffen ist möglich, weil sich die eingesetzten Farbstoffe zwar bei einer gemeinsamen Wellenlänge anregen lassen, aber über unterschiedliche, für den jeweiligen Farbstoff charakteristische Emmissionsspektren verfügen.
Diese Untersuchung wird vor allem für hämatologische Erkrankungen eingesetzt. So lassen sich niedrig maligne Lymphome an zytologisch gewonnenem und in Nährmedium gebrachtem Material diagnostizieren und unterteilen.
Wir führen diese Untersuchung in Zusammenarbeit mit einem spezialisierten auswärtigen Zentrum durch.

Die molekularpathologische Diagnostik ist ein integrativer Teil des histologischen / zytologischen diagnostischen Verfahrens. Sie befasst sich hauptsächlich mit genetischen Alterationen von neoplastischen Läsionen am histologischen und zytologischen Material.

Mutationsanalyse

Jeder Tumor zeigt eine unterschiedliche Konstellation von genetischen Veränderungen (Mutationen). Die Information über diese Mutationen, die man mittels Sequenzierung von DNA gewinnt, spielt eine immer wichtigere Rolle sowohl in der Diagnostik als auch in der onkologischen Behandlung (prognostisch und prädiktiv für den Therapieentscheid).
Es werden hauptsächlich zwei Sequenzierungsmethoden angewendet:
Sanger Sequenzierung und Next Generation Sequencing (NGS).

Material
Für beide Methoden können Schnitt-/Blockpräparate oder auch zytologische Präparate verwendet werden.

Sanger Sequenzierung
Die Sanger Sequenzierung gilt als eine der klassischen Methoden der DNA-Sequenzierung und ermöglicht die Bestimmung der Basenabfolge von kurzen Sequenzen eines bestimmten Gens. In der Tumordiagnostik werden DNA-Sequenzen von erkrankten Patienten mit DNA-Sequenzen von gesunden Menschen zur Identifizierung von mutierten DNA-Sequenzen im Tumor verglichen.

Wir bieten die Analyse folgender Gene mittels Sanger Sequenzierung an:
□ BRAF (exon 15)
□ EGFR (exon 18, 19, 20, 21)
□ ERBB2/HER2 (exon 19, 20)
□ KRAS (exon 2, 3, 4)
□ KIT (exon 8, 9, 11, 13, 14, 17)
□ NRAS (exon 2, 3, 4)
□ PDGFRA (exon 12, 18)

Next Generation Sequencing (NGS)
Die Detektion aller relevanten Mutationen ist heutzutage durch parallele Sequenzierung von mehreren Genen am Tumor DNA und RNA mittels Hochdurchsatz-Sequenzierung (sog. Next Generation Sequencing, NGS) inner¬halb kurzer Zeit möglich. NGS ermöglicht insbesondere die zielgerichtete DNA- und RNA-basierte Sequenzierung zur simultanen Detektion klinisch relevanter Mutationen, Kopienzahlvariationen und Fusionstranskripten. Einsetzbar auch für kleine Biopsien mit geringem Tumorzellengehalt. Diese Methode zeigt robuste Ergebnisse in der Routinediagnostik und er¬füllt die heutigen Anforderungen für die Therapiestratifizierung.

In unserem Angebot stehen folgende Panels zur Verfügung:
□ Oncomine™ Focus Assay
□ DNA Panel: 35 Gene, 19 CNV
□ RNA Panel: 23 Gene (Fusionen)
□ Oncomine™ BRCA Panel (alle kodierenden Abschnitte der Gene BRCA1 und BRCA2)
□ Oncomine™ Tumor Mutation Load Assay (TMB, Tumormutationslast pro Megabase, 409 Gene)

Details zu den NGS-Panel

Auftragsformular

Fragmentanalyse

Nach einer Amplifikation bestimmter DNA-Fragmente erlaubt die Fragmentanalyse die Visualisierung deren Länge mittels Kapillarelektrophorese. Diese Technik wird in der Diagnostik von lymphoproliferativen Erkrankungen (Klonalitätsanalysen) und in der Bestimmung der Mikrosatelliten-Instabilität von kolorektalen Karzinomen eingesetzt.

Mikrosatelliten-Instabilität (MSI)
Mikrosatelliten sind kurze, nichtcodierende DNA-Sequenzen von 2 bis 6 Basenpaaren Länge, die im Genom eines Organismus oft wiederholt werden. Bei Mikrosatelliten-Instabilität (MSI) kommt es zu Längenveränderungen innerhalb dieser Mikrosatelliten als Folge defekter DNA-Reparaturproteine (hMLH1, hMSH2, hMSH6, hPMS1, hPMS2). Wenn eine Mikrosatelliten-Instabilität im untersuchten Tumor auftritt, kann man davon ausgehen, dass beim Patienten ein Gendefekt im DNA-Reparatursystem vorliegt. Dieser Gendefekt kann nur im Tumor vorliegen (sporadisch) oder selten vererbt sein (Mutation in der Keimbahn). In solchen Fällen ist eine genetische Beratung und erweiterte familiäre Vorsorge anzuraten.
Die Untersuchung auf Mikrosatelliten-Instabilität wird häufig bei kolorektalen Karzinomen durchgeführt, u.a. zum Ausschluss von hereditären non-polypösen kolorektalen Karzinomen (Lynch-Syndrom).

In unserem Angebot:
□ PCR (Bethesda Panel, NR-21, NR-24, NR-27)

Klonalitätsanalysen
Die Klonalitätsanalyse wird zur Unterstützung der Diagnose von B- oder T-Lymphomen eingesetzt. Diese Methode basiert auf den einzigartigen Genumlagerungen (Rearrangements) der B-Zell-Rezeptoren (Ig) und T-Zell-Rezeptoren (TCR) in den B- bzw. T-Lymphozyten. Die Länge der Modifikation variiert zwischen rearrangierten Genkombinationen unterschiedlicher Lymphozyten bei reaktiven Prozessen (polyklonales Muster), jedoch nicht bei neoplastischen Lymphozyten, die klonalen Abkömmlinge einer einzigen transformierten Zelle repräsentieren (monoklonales Muster).

In unserem Angebot:
□ IgH PCR (B-Zell-Neoplasie)
□ TCRG PCR (T-Zell-Neoplasie)

FISH

Bei der Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) werden fluoreszenzmarkierte Sonden zur Analyse von genetischen Veränderungen (Amplifikationen, Deletionen, Translokationen) bei Tumoren eingesetzt. Sie dienen einerseits der Tumorklassierung (vor allem bei Lymphomen und Weichteiltumoren), andererseits bei gewissen Tumoren der Bestimmung von Prognosefaktoren oder therapeutischen Targets (bei Mammakarzinomen oder Adenokarzinomen der Lunge).

Material
Es können Schnitt-/Blockpräparate oder auch zytologische (ink. gefärbte) Präparate verwendet werden.

In unserem Angebot stehen folgende Sonden zur Verfügung:

Liposarkome
□ MDM2/CEN 12 Amplifikation 12q15

Lunge
□ ALK Translokation, Sonde: BA, 2p23
□ ROS1 Translokation, Sonde: BA, 6q22
□ RET Translokation, Sonde: BA, 10q11
□ MET/CEP7 Amplifikation 7q31/7p11.1

Lymphome
□ MYC Translokation, Sonde: BA, 8q24
□ BCL2 Translokation, Sonde: BA, 18q21
□ BCL6 Translokation, Sonde: BA, 3q27
□ CCND1 Translokation, Sonde: BA, 11q13
□ MALT1 Translokation, Sonde: BA, 18q21

Mamma und Magen
□ HER2/CEN 17 Amplifikation 17q12

HISTOPATHOLOGIE
Wir bitten Sie, uns die Gewebeproben wie folgt zuzusenden:
 
Normalfall
Proben in gepuffertem 4%igem Formalin. Bitte verwenden Sie genügend grosse Einsendegefässe mit einem Verhältnis Probe zu Fixationsmittel von 1 zu 10.

Spezialfälle
Schnellschnitte: Gewebe immer nativ einsenden
Frühzeitig telefonisch voranmelden.
Tel. Pathologie: 044 269 99 88
Unbedingt Telefonnummer und Kontaktperson für Rückruf auf dem Einsendeformular vermerken. Schnellschnitte werden auf Wunsch von unserem  Kurier abgeholt.

Lymphomverdacht: Bei kurzem Transportweg von weniger als 1 Stunde Gewebe nativ (mit NaCl-Tupfer feucht halten) gekühlt auf Eis (aber das Gewebe darf nicht gefrieren!!!).
Bei längerem Transportweg 1/2 bis 3/4 des exzidierten Gewebes in gepuffertem Formalin. Restgewebe nativ (mit NaCl-Tupfer feucht halten).

Knochenmark: Schaffer-Lösung

Hodenbiopsie: Modifizierte Karnovsky-Fixierlösung

Keine Spezialfälle: Gewebe zur Bestimmung der Hormon-Rezeptoren, von Her-2-neu oder EGFR sind keine Spezialfälle mehr. Die Bestimmung erfolgt am formalinfixierten Material.

Bitte verwenden Sie folgende Einsendegefässe

Biopsien  901-902

Kleine Exzisionen  901-903

Curettagen  902-904

Resektate  903-907

Bei allgemeinen Fragen zur Präanalytik Histologie wenden Sie sich bitte an
Dr. med. F. Bannwart, Facharzt FMH Pathologie
Direkte Telefonverbindung: 044 269 99 38
E-Mail

KLINISCHE ZYTOLOGIE
Bitte beachten sie die folgenden Einsendehinweise

Abstriche
Konventionelle Objektträgerausstriche sofort fixieren (Lufttrocknung vermeiden durch sofortige Fixation mit 95-100% Alkohol oder Fixationsspray)

Körperflüssigkeiten
Ausser bei Mamillensekreten ist eine gleichzeitige mikrobiologische Untersuchung möglich. Wir bitten Sie, diesen Wunsch auf dem Einsendeformular klar zu vermerken
Wichtig: Alle Körperflüssigkeiten müssen bis zum Versand kühl gelagert werden
Sputum
Morgensputum, nach Spülen von Mund und Rachen
Sofortige Einsendung ohne Zusätze. Wiederholung der Untersuchung an drei aufeinanderfolgenden Tagen sinnvoll

Bronchialsekret/-lavage
Sofortige Einsendung ohne Zusätze
    
BAL ohne Zelldifferenzierung
Sofortige Einsendung ohne Zusätze
 Optimal: möglichst geringe Kontamination durch Bronchialsekret
BAL mit Zelldifferenzierung: Telefonische Voranmeldung nötig (044 269 99 88).
Sollte unserem Kurier bis spätestens 15:00 Uhr des gleichen Tages abgegeben werden.

EBUS (Endobronchiale ultraschallgesteuerte Punktion)
Material alles in Formalin geben.
    
Bürstenabstriche allgemein
Ausschwenken und Abrollen der Bürste im ThinPrep-Medium (optimale Fixierung) und/oder auch direkt auf einen Objektträger (mit sofortiger Fixation mit 95-100%-igem Alkohol oder Fixationsspray) wie z. B. von Bronchien, Oesophagus, Gallengang, Ductus pancreaticus etc. Aszites, Pleura-, Perikard-, Gelenkergüsse, Zysten
Gesamtes (!) Punktat einsenden (nicht ausstreichen!)
Sofortige Einsendung ohne Zusätze
Haltbarkeit: max.24 Stunden im Kühlschrank
 
Mamillensekrete
Objektträgerausstriche sofort fixieren (Lufttrocknung vermeiden)
Fixation mit 95–100%igem Alkohol oder Fixationsspray
Fixationsspray bei uns erhältlich (Siehe Bestellformular Pathologie)

Urin
Zweiter Morgenurin nach forcierter Diurese (24 Stunden-Urin und erster Morgenurin sind ungeeignet)
Vorherige Reinigung des äusseren Genitale, sofortige Einsendung ohne Zusätze
    
Spülflüssigkeiten
(z.B. Harnwege, Peritoneum): Gesamte Spülflüssigkeit einsenden
Sofortige Einsendung ohne Zusätze
    
Liquor cerebrospinalis
Für ein optimales Resultat muss die Probe (ca. 2ml) innerhalb einer Stunde verarbeitet werden.
Falls dies nicht möglich ist, kann die Einsendung im ThinPrep-Medium erfolgen.
Telefonische Voranmeldung nötig (044 269 99 88) und sofort per Kurier einsenden

Asservierung von Feinnadelpunktatmaterial
Voraussetzungen für gute diagnostische Resultate sind:
    Genügend Punktionserfahrung
    Allenfalls ein Ultraschallgerät
    Eine optimale Ausstrich- und Fixationstechnik

Ohne eine optimale Ausstrich- und Fixationstechnik kann keine zuverlässige Diagnostik betrieben werden.
Sollten Sie die Feinnadelpunktion selber durchführen, möchten wir Sie auf folgende Punkte hinweisen:
Läsion am besten unter sonographischer Kontrolle anstechen, aspirieren und fächerförmig punktieren (dabei einige Sekunden in der Läsion verbleiben), Spritze entlasten und aus der Läsion entfernen, Nadel kurz wegnehmen, um in der Spritze Luft anzusaugen, Materialausspritzen auf einen beschrifteten Objektträger sofort ausstreichen (nicht zu dünn und nicht zu dick!). So rasch wie möglich (in Sekundenschnelle) in ein mit 96%-igem Alkohol gefülltes Gefäss geben
Zur Erleichterung der Fixation bieten wir Ihnen Gefässe mit einem Drehverschluss an (Bestellkarte Nr 02001640), in welchen Sie die Ausstriche direkt fixieren und uns per Kurier so zustellen.
Sie müssen lediglich 96%-igen Alkohol in Ihrer Apotheke bestellen, da wir diesen nicht liefern können (Vergällungszusatz beeinflusst die Fixation nicht).
Neben 2-3 gut ausgestrichenen und fixierten konventionellen Ausstrichen lohnt es sich, einen Teil des Punktates in Formalin (oder allenfalls in Cytolyt) auszuspritzen. Davon können wir einen Zellblock anfertigen, was uns erlaubt, immunhistochemische Färbungen zur näheren Differenzierung eines Prozesses anzufertigen.
    
Asservierung bei Lymphknoten-Vergrösserungen
Zytologische Abklärungen von Lymphknotenvergrösserungen unklarer Aetiologie:
    entzündlich unspezifisch / reaktiv
    entzündlich spezifisch (z.B.Toxoplasmose, Tuberkulose etc.)
    Metastasen
    Non-Hodgkin Lymphome
    - lymphozytär / follicular
    - blastär
    Hodgkin Lymphome

Neben dem beschriebenen Zellblock, der für alle Feinnadelpunktate zur weiteren Differenzierung empfehlenswert ist, empfiehlt sich bei klinischem / sonographischem Verdacht auf ein (kleinzelliges) Non Hodgkin-Lymphom die zusätzliche Asservation von Punktatmaterial für eine Immunphäno-
typisierung in NaCl oder PBS-Lösung (FACS-Analyse/
Durchflusszytometrie).